rt-pcr溶解曲线异常，如何解决？

如题，我刚做了一些pcr，但是曲线很少是单峰的，不知道是自己cDNA没有提取好还是引物问题，求大家帮忙看一下。谢了

图1和11是内参。顺序变了，大家帮忙解答一下。用的锐博的试剂盒，每次只能逆20个样，试剂盒挺贵的，所以现在也不敢尝试。不知道原因

生命科学

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应该是有引物二聚体加非特异扩增，你自己的产物峰都偏低了，也有可能有污染，或者mix特异性差。

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2024-05-06 02:20:10

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有可能是空气污染，pcr产物的污染。有的公司的mix为了扩增效率高，用的酶量偏多，所以特异性可能不好。还有就是你的mix的热启动的酶吗

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2024-05-06 03:02:15

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以后做qpcr，都带上阴性对照，就是不加dna模板，这样看看到底是不是引物二聚体

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2024-05-06 03:10:40

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