up vote 246 down vote

2024-04-30 01:24:40

葡萄糖刺激INS-1细胞不产生胰岛素啊，怎么办？

我现在做大鼠胰岛素瘤细胞INS-1，用不同浓度葡萄糖刺激INS-1细胞，不产生胰岛素啊，检测不到啊！我是先用不含葡萄糖的KRB buffer孵育2个小时，然后再换成2.8mM和16.7mM的葡萄糖的KRB buffer 2个小时后，取上清用ELISA检测胰岛素，但是基本上检测不到啊。有做过的吗？有遇到过这种问题的吗？

我看国外文献里要用酸式乙醇提取上清液的胰岛素啊，不知道各位试过么
The cellular insulin was extracted by incubation in 1ml of acid-ethanol (ethanol/H2O/HCl, 14:57:3) overnight at 4°C and centrifuged at 700g for 3 min.

细胞生物学肿瘤学

回答 0 评论

更多

2个回答

up vote 5 down vote

我用的也是24孔板，接种细胞数大约2*105个，第二天做GSIS，但是胰岛素含量很低，比ELISA试剂盒的下限还要低。

0 评论收藏举报

2024-04-30 05:03:03

up vote 10 down vote

我用的放免法做的，灵敏度更高。

0 评论收藏举报

2024-04-30 05:03:57

你的回答

提问时间：	2024-04-30
浏览量：	3015
最近回答：	2024-04-30

相关问题

mRNA的表达量是升高的，能否说明那它的蛋白质的表... 回答 11

有别的办法可以有效回收SDS-PAGE中的蛋白条带... 回答 6

如何预估止水帷幕的防渗系数？回答 18

从水中提取扁桃酸怎么能把扁桃酸游离出来呢？？回答 6

对悬浮细胞做激光共聚焦荧光扫描成像如何做粘附处理，... 回答 9

能否只做磷酸化的抗体，而不做非磷酸化的抗体回答 6

2-DE的差异蛋白还需用Real-time RT-... 回答 5

参与后续反应的基因毒性杂质如何控制？回答 5

酯化脱水怎么提高转化率？回答 6

仿制药需要做出原料的所有手性杂质吗？回答 5