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2024-05-05 20:16:35

如何解决细胞长得很慢的问题？

前几天传代的前脂肪细胞，1:3传代，胰酶消化后，其中一瓶传代依然用了原培养瓶（残留些胰酶），另外两个用新瓶培养。今天发现用新瓶培养的已经长到抑制状态可以进行分化了，可是在原培养瓶传代的细胞，长的密度还不到50%，细胞漂浮变多，觉得可能是传代时候胰酶没处理干净，请问有没有前辈遇到过这样的情况，这是什么原因，应该怎样避免？

细胞生物学 生物化学 凋亡坏死与自噬
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6个回答

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传代为什么要接种到原来的旧培养瓶里？即使用胰酶消化，瓶底的细胞也不可能一个不剩的全部消化下来，而且本身也会残留少许胰酶，细胞长得慢很正常

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2024-05-05 20:35:38
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trypsin可以被fbs中和 所以传原瓶可以的 长得慢可以适当提升FBS的百分比 12%左右试试看 高了细胞容易长变形 也容易污染


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2024-05-05 20:43:58
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 一般胰酶里会含有EDTA，即使血清可以终止胰酶的消化，但是残留的EDTA会螯合钙离子影响细胞贴壁，也会影响细胞生长


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2024-05-05 20:44:29
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一般用的皿都是polylysine表面处理的 一般来说不用太担心贴壁问题 细胞培养操作手册里面还有不弃trypsin直接加fbs中和的方法 不过那样确实不好 我一般来说弃trypsin以后轻轻吹打


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2024-05-05 20:49:24
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血清对胰酶的意志作用很强的，排除胰酶影响的话，1 看细胞缩成团后 即使移除胰酶 然后再消化一阵；2 消化彻底后 加培养基 离心 去上清


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2024-05-05 20:50:01
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这样可能是细胞对胰酶比较敏感，细胞被消化过度而导致的，养细胞会碰到这样的情况；下次传代时可以将细胞消化后，加胰酶等量含血清培养基终止消化，然后离心，弃上清，用少量培养基吹匀，再铺板


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2024-05-05 20:50:45

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